国共合作时期，一队日军正在押着几个浑身是伤的男女犯人在小路上行进，并押到了刑场，日军将要在刑场对他们枪毙时。以国第二世界整理发布民党女连长海娅娜为首的一支武装人员早以埋伏在刑场周围，和日本人展开了激战。其他几名犯人被日本人打死了，柳丝丝拿到了日本军官的枪，她铐着手把日本军官打死了。战斗中的海娅娜被很匆忙的召回了，在战斗中，他们并以不及掩耳之势救了一个年轻的女犯人柳丝丝和其他三名男犯人。海娅娜回来后，处长说具体任务让她去找马科长，原来国民党为阻止日军北上要组建一支敢死队，代号“猛犸”，敢死队是十个人，有男有女。在海娅娜的强烈要求下，马科长答应组建一支只有五人的女子敢死队，海娅娜想让柳丝丝加入敢死队，但处长说不了解她的情况，不同意，带她去看几个队员的资料。海娅娜还是想要柳丝丝，处长向她介绍了柳丝

海娅娜和柳丝丝来到监狱，他们见到朱玉媛，海娅娜让朱玉媛站起来跟她走，她去拿出海娅娜的枪，然后自杀了。海娅娜和柳丝丝离开，看守监狱的头不让他们离开，让他们给他一个交代，并带人用枪挡住了他们的去路，海娅娜说她是上级的命令，然后他们开车离开了。小村一郎带几个兵来到了妓院，他要找香茉莉，海娅娜和柳丝丝半夜开着车，在一个荒郊野外，他们换了衣服然后用树枝把车挡住。他们来到城门口，日本看守城门的人看了他们的良民证，然后让他们进去了。娅娜和丝丝来到了妓院门口，说是来找小村一郎的，让他们进去了，他们冲到了小村一郎和香茉莉的房间，让丝丝故意诱惑小村一郎。娅娜跟香茉莉说话，说出了她的背景，她本名叫米雪儿，让她跟他们走，她不走，娅娜给了她两个耳光，丝丝又给了她一耳光，借米雪儿的手杀死了小村一郎。日本人听到了枪声，上

米雪儿摸着丝丝的军帽，说已经有两年没有戴过了，这时娅娜过来把米雪儿带走，把她到处长面前，处长看了米雪儿后让娅娜带她去体检、注册。司令打电话给队长，让他马上调查小村一郎，师长让鲁西长官去见他，她来到师长办公室，师长让她马上到情报处报道。苏芮来见营长，营长问她日本特工站的任务完成的怎么样了，她说全部炸掉了，一点不留。营长让她去军署情报处报道，苏芮问是什么任务，他说A级情报，绝密她去了就知道了。鲁西晚上去情报处报到时，在路上，被米雪儿和丝丝截住，她以自己的伸手截获了雪儿和丝丝的枪，这时娅娜出现，让他们停手，并介绍了双方。苏芮到情报处报道，站岗的让她拿出自己的证件，她拿出后，让她进去了。他们四个在山上遇到了土匪，之后把土匪全部解决了。他们四个回房间睡觉时，娅娜不允许他们开灯，而苏芮正在房中等着，她开

在队长海娅娜的率领下，队员们开始艰苦而又认真的训练。军部来电，皮处长再一次下达命令。原来此次，敢死队要截击通过石漫滩的日军特派员，将其活捉。出发前，皮处长宣读上级来电，将五人逐级晋升。经过一番激战，敢死队出色完成任务，击毙了所有的保卫人员，活捉了特派员。日军极其恼怒，在各路口设卡盘查。

敢死队挟持特派员巧妙躲过关卡，回到部队。一列日军军火列车在山口车站上待命北上，敢死队奉命在两天内炸毁列车。海娅娜拒绝了皮处长多带卫兵的建议，只带着四名队员踏上行程。众人乔装为日军混过卡哨潜进车站侦查，遇到同样想炸毁列车的八路军武工队侦查员于刚，众人商议如何炸毁列车。

上峰交代处长，通知敢死队在完成军火列车爆炸任务的同时要将十拱桥和马山隧道一并炸毁。日军方面也交代桥梁和隧道定要加强防范。敢死队也收到了上峰来电，对于上峰交代的任务坚决执行，立刻和于队长研究执行方案。日军同时也在严密部署。敢死队成员乔装打扮成普通人的样子，打入敌人内部，等待机会。

鲁西和米雪儿探听回来，告知海娅娜敌人戒备森严，没有办法进入停车场，导致基本没有收获。于队长则通过内线了解到日本军列的准确的开车时间，但是同时又来一辆车街头，以此推断不是去往同一方向。苏芮提出质疑，表明炸药不够。而海娅娜却坚决表明态度，今晚一定要全部炸毁。苏芮急中生智想出了办法，但是提出必须有一辆火车驶出车站再炸。

处长命令海娅娜即刻赶到淮海市，照电报执行任务。于队长和敢死队研究淮海市的兵力部署。晚上依旧分两队，摸清楚敌人的兵力布置和哨位位置以及丁显处长的关押点和进入和撤出的路线。经过了一番周密的部署，开始行动。

敢死队一行人打扮成日本人的模样，开车进入敌区。来到监狱前，丁队长想看守的日军说，少佐有令，要将政治犯丁显送到后防军医院治疗。日军发现了不对劲，但被敢死队制服。救出丁处长之后，敢死队和日军双方展开激战。成功撤离。但路上日军有大量埋伏。

马奎叛变投敌，隐藏在日军后防医院高层病房内，同在病房内的还有几个日军的高级军官，敢死队队长海娅娜和武工队副队长于刚奉命前去铲除这个叛徒。敌人戒备森严，根本无法靠近顶楼。海娅娜和米雪儿假扮护士，骗过看守，进入顶楼高级病房，接连杀死了马奎和七八个日军高级军官，在于刚和鲁西的掩护下，两人顺利从后窗撤出。

丝丝回想当初在山上给黑老大做压寨夫人的日子，感慨良多。于刚要回队伍了，大家依依惜别，期待下一次合作。日军听闻军官被杀震怒，抽调各部门精英人员彻查此事。敢死队接到任务，要求立即赶往九寨山区，两天内炸掉那里的明月桥，以阻止日军装甲部队北上。海娅娜想到路途中的云山有个日军的炸药库，路上，接到缉捕命令的日军截击车辆。

姑娘们赶到炸药库，设法抢出炸药，炸毁了汽车和炸药库，徒步上山赶往明月桥。敌人猜测出敢死队抢夺炸药的目的，派出大量兵力追击。敢死队救了正被日军侮辱的农家两口，带着干粮又开始赶路。桥上重兵把守，海娅娜决定从守军相对薄弱的桥北下手。

海娅娜带领敢死队队员来到月明桥附近侦查敌军的部署情况。休息之余，梅娅娜想起母亲，不禁感伤落泪。日军装甲师一部三部要通过月明桥，大佐交代务必确保这座桥的安全。并提醒最近有几个女人神出鬼没，很是狡猾，让大家集中精力。海队长一直没给处长消息，这让处长很是担忧。

海队长提醒队员们小心敌人设有潜伏哨，命令鲁西和米雪儿观察一下周围情况。海队长侦查之后，表示敌人戒备还是十分森严，想要接近桥头相当困难。米雪儿给苏芮发完信号之后，队员们会合。各种办法都想了一遍之后，海队长决定带着苏芮再回去一趟，看看能不能从河上摸出一条道来接近桥头。

敢死队队员经过努力，终于到了月明桥下，安放炸药。就在这时，她们的行踪被敌军发现。敌军射击，双方又是一阵激战。月明桥被炸毁。米雪儿不幸受伤。海队长带领大家来到安全处，雪儿昏迷不醒，柳丝丝陷入了深深的自责之中。终于，米雪儿醒了。处长对这次行动中受伤人员表示慰问并决定派出人员接应敢死队。

梁营长一行人突破敌人的重重围堵，日夜兼程赶路。敢死队员们抓了野鸡野兔，在山洞里烤野味，大家吃得津津有味，看着野味，丝丝想起爷爷。梁营长一行人误入日军防区，遭遇小伙日军，心念接应任务的梁营长下令躲避，不与日军接火。天黑时分，梁营长一行终于找到敢死队。

梁营长和海娅娜接应，将皮处长的新的命令传达给敢死队，立刻护送雪儿赶往后方医院，队员们依依惜别，赶赴更加残酷的战场。躺在担架上，雪儿回忆自己崴了脚，大治背着自己的情景。海队长接受了新的任务，大家准备乔装进城，发现日军盘查甚严，众人扮作宪兵司令部的上尉特工，混进城内。

原来据可靠消息，日军从海上通道运来一批军用药品盘尼西林，敢死队需要在日军启用之前采取一切可以施展的手段搞到药品，以解我军之需。日本医院王医生气愤医院把药品入库，不让伤员使用。队员们乔装成医务人员混进医院，鲁西装病，海队长骗出院长，丝丝和苏芮潜入院长室调查，设法从特品药库中取出药品。

队员们悄悄将药品运出医院，却发现电台出了问题，接收不到电报了。皮处长接到军部电话，已收到盘尼西林，却联系不到敢死队队员了。皮处长派出人员携带电台到都昌区呼叫查寻，而鲁西则带着坏的电台踏上回师部更换电台的路途。

丝丝回想自己想回部队，黑老大劝说自己，两人一起下山的情景，感慨万千。鲁西路遇黑老大一伙的土匪，巧借丝丝名义脱身。携带新电台的战士小高昼夜奔波，着急把新电台送到敢死队手中。鲁西想起自己立誓扫除日本鬼子的誓言，躲避土匪时受伤，遇到来送电台的小高。

小高帮助失去枪的鲁西打跑了土匪，搀扶受伤的鲁西前去云台山寻找海娅娜。落荒而逃的土匪向黑老大报告此事，黑老大得知丝丝消息。情报处收到敢死队发来电台信号，获知敢死队消息，皮处长命令海娅娜带领队员到临山接受新的任务。队员们奉命摧毁日军特务组织秘密联络站，因叛徒泄密行动失败，丝丝为了掩护苏芮中了枪。

丝丝临终前拜托大家上黑山寨找黑老大，让他下山抗日。队员们被一个中队围困在石人山，敌人又派来增援部队，队员们英勇抵抗，冲出重围，日军司令官闻之震怒。队员们决定前往黑山寨，找黑老大告知丝丝遗愿。

土匪把嚒梅队长等三人绑到自己的地盘，大哥想弄清楚怎么回事。老四说，就是鲁西这个女人，上次被她虚晃一枪，导致死了好几个兄弟们。大哥的夫人在梅队长手里。

黑老大立誓为丝丝报仇，同意下山接受改编，为抗日贡献力量。看着山头美丽的风景，苏芮和鲁西抱头痛哭，感慨丝丝再也看不到了。黑老大告别丝丝，决定和八路军武工队联系。米雪儿伤愈归队，队员们欣喜。新的任务是秘密盗取日军东江作战布防图，但不能打草惊蛇，以防日军更换作战方案。

队员们经过严密侦查发现，敌人戒备森严，海娅娜决定由自己和苏芮翻墙入室，雪儿和鲁西负责吸引敌人注意。海娅娜和苏芮顺利找到布防图，拍下照片，还原现场。苏芮恶梦哭喊，雪儿得知丝丝死讯，伤心难过。敢死队接到新的命令，协助当地联络站铲除汉奸朱兴。

梅队长得到消息说汉奸朱兴将要向日军提供情报，此人已经被日军严密的保护起来，任何人无法接近。上峰命令，务必除掉他。梅队长表示必须等到总部来电才可以执行。正在这时就收到了总部来电。为了安全考虑，梅队长不让联络站同志参与。

唐兰严词拒绝日军要求，日军把病菌注射进唐兰孙女体内，以逼迫他研制治疗药品，唐兰想到被日军杀死的太太、儿子和儿媳，断然拒绝研制药品。于刚奉命营救唐博士，在敢死队的配合下，大家周密部署，救出了唐博士。日军节节败退，日军司令官森田一男自尽身亡。猛犸敢死队还继续在行动，英勇战斗在抗日最前沿的阵地……